白介素1βELISA試劑盒:精準檢測炎癥與免疫的關鍵工具
白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)是一種重要的促炎細胞因子,在免疫調節、炎癥反應及多種疾病的發生發展中發揮關鍵作用。其異常表達與類風濕性關節炎、動脈粥樣硬化、糖尿病以及多種癌癥密切相關。因此,精準檢測IL-1β的濃度對于疾病機制研究和臨床診斷具有重要意義。ELISA(酶聯免疫吸附測定)技術因其高特異性、高靈敏度和操作簡便,成為檢測IL-1β的主流方法。
檢測原理
白介素1βELISA試劑盒主要基于雙抗體夾心法。其檢測原理如下:
1.預包被與樣本捕獲:將特異性抗IL-1β單克隆抗體固定于酶標板孔中,樣本中的IL-1β通過抗原-抗體反應被捕獲。
2.檢測抗體結合:加入標記有二抗,與被捕獲的IL-1β形成“抗體-抗原-二抗”復合物。
3.信號放大與顯色:加入鏈霉親和素(Streptavidin)-辣根過氧化物酶(HRP)復合物,隨后加入顯色底物TMB。在HRP的催化下,TMB發生氧化反應,生成藍色產物,加入終止液后變為黃色。產物的吸光度(450nm)與樣本中IL-1β的濃度呈正比。
產品特點
-高靈敏度:優化的抗體設計使得檢測下限可達極低水平,如人IL-1β檢測下限可達5.8 pg/mL。
-高特異性:通過抗體篩選和優化,交叉反應率極低,與IL-1α等類似物無明顯干擾。
-操作簡便:標準化的操作流程和試劑配置,使得檢測過程簡單易行。
操作步驟
1.準備工作:仔細閱讀試劑盒說明書,準備好所有試劑和器材,包括酶標儀、微量加樣器等。
2.樣本處理:根據要求對樣本進行稀釋或離心處理。
3.加樣:將處理后的樣本加入酶標板孔中。
4.加酶標抗體:加入標記的二抗。
5.溫育:在規定溫度和時間下進行溫育。
6.洗滌:用洗滌液清洗反應孔,去除未結合的抗體。
7.顯色:加入顯色液,產生顏色變化。
8.終止反應:加入終止液,停止反應。
9.測定:用酶標儀測定吸光度,根據標準曲線計算IL-1β濃度。
應用場景
白介素1βELISA試劑盒廣泛應用于以下領域:
-基礎研究:用于研究炎癥機制、細胞信號通路等,如解析TLR4/NF-κB通路在胰腺炎中的作用。
-臨床診斷:檢測患者血清、血漿或細胞培養上清中的IL-1β濃度,輔助診斷炎癥性疾病。
-藥物研發:評估藥物對IL-1β表達的影響,助力抗炎藥物的研發。
注意事項
-樣本保存:樣本需妥善保存,避免反復凍融。血清樣本可保存于2-8℃不超過1周,-20℃不超過30天,-80℃可長期保存。
-操作規范:嚴格遵循試劑盒說明書操作,避免交叉污染。
-安全防護:操作過程中需佩戴防護裝備,避免接觸酸性終止液。
白介素1βELISA試劑盒憑借其高靈敏度、高特異性和簡便操作,已成為研究和臨床檢測IL-1β的工具。其在炎癥研究、疾病診斷和藥物開發中的廣泛應用,為相關領域的研究和實踐提供了有力支持。
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